1.醋酸菌斜面培养基：葡萄糖
1克，酵母膏1克，碳酸钙
1克，琼脂2.5克，水100毫升
2.斜面培养斜面制作：培养基按配方调配好（碳酸钙先不加入），分装试管，灭菌备用。碳酸钙按比例分装、灭菌。摆斜面前将培养基和碳酸钙混合，用手搓均匀，然后摆斜面，备用3. Acetobacter Medium (醋酸菌培养基) Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10g CaCO3 20g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水
) 1000ml Adjust (调) pH to 6.8 适用范围：恶臭醋酸杆菌混浊变种
3．1 斜面培养基葡萄糖8g，酵母粉
10g碳酸钙5g琼脂15~20g水1000mLpH5.5，分装试管。0.IMPa灭菌20min。95％酒精(食用级)40mL。摆斜面，
3．2 液体增殖培养基葡萄糖10g 酵母粉10g pH5.5水1000mL灭菌后加入酒精(食用级)40mL 0.1MPa灭菌20min。
3．3 醋酸菌种的制备扩大培养过程：安瓿管
，液体试管1．液体试管2，100mL三角瓶，500mL三角瓶，1000mL三角瓶，种子罐。
3．3．1 安瓿管开启：酒精棉球擦抹三次，用重器撞击，打开，注入0.5mL无菌水，将菌球溶解，全部注入装有10mL液体培养基的18×180试管1内，30℃培养72h，每2h摇动—次
3．3．2 菌体生长：培养基变混浊后，颜色变浅，对光观察摇动时有云雾状金属光泽。每只装有10mL液体培养基的试管2接入lmL或0.5mL菌液，30℃培养48h，每2h摇动—次。
3．3．3 三角瓶三级扩培，三角瓶中培养基的装量为50％，每级按种量在10％左右，在转换振荡器上恒温培养，培养温度均为30℃，时间依次缩短为36、36、24h，
3．3．4 种子罐培养基同前 配料后种子罐夹套加热灭菌100℃保持15min，冷却后，先加入4％食用酒精
，无菌操作接入菌种。接种量为10％~12％，温度保持在30℃±1℃，通无菌空气，菌体生长时间为24~36h．视菌体生长情况及镜检结果而定
3．3．5 每次接种前，先将菌种进行外观观察 。有异样情况者，作涂片、染色、镜检观察，菌体生长不正常或染菌的三角瓶不得使用。外观正常者抽检2—3个样品，在确保菌株纯度、无污染的情况下转入下一级菌种扩培。培养醋酸菌时，需要用含糖或酵母膏（维生素B
）的培养基，在肉汤蛋白胨培养基上生长不良。大多数菌株可用六碳糖和甘油
作为碳源
，对甘露醇
和葡萄糖酸盐很少能利用或不能利用，不分解乳糖
、糊精和淀粉。醋酸菌不形成芽孢，一般为形态近于球菌的短杆菌。醋酸菌可在PH4.3以下繁殖，增殖时多在液面成膜。幼龄细胞呈G-，老龄细胞呈可变性，因而染色只用来作为鉴定时的参考因素。
醋酸菌增殖时生成挥发性酸臭。感官判断类似于一种丁香成分，和纯醋酸的嗅感不同。防止方法不外呼改善工厂的环境卫生，加强卫生管理
自制红茶菌菌种制作过程
红茶菌是由红茶(或用绿茶和乌龙茶)、白糖(或冰糖、蜂蜜)和水酿制而成。其培养方法可以分为培养液的制作与接种培养：（1）培养液的制作：A、按比例把茶叶，洁净水，白糖称取；B、茶叶用白纱布包好；C、水放铝锅或钢精锅烧开杀菌；D、把茶叶包放入开水2--3分钟，捞出来；E、放入白糖使溶化；F、把茶叶水离火冷却到35度以下即可。

（2） 接种培养：在消毒过的大口玻璃瓶里或者瓷缸里培养，把母液加入适量冲洗内壁后到掉，再把好的母菌液，菌膜加入培养瓶，把凉凉的培养液加入培养瓶，用纱布封口防虫，及灰尘。把培养瓶放阳光没有直射的地方培养，温度高发酵快，温度低发酵慢，一般在30度至35度一个星期左右，菌液表面结成乳白色新鲜菌膜，培养液即发酵成甜酸的红茶菌液，即可饮用。
红茶菌原始菌种制作教程
1、准备好一个能装2-5斤水的玻璃瓶和一双筷子，用开水消毒后备用。
2、用水壶装上干净水（按一件红茶菌菌种用一斤水的比例计算）然后用干净纱布包一点茶叶、包一点白糖（任何茶叶均可，红茶更好，掌握茶的浓度比平时喝的茶水要淡一些，有一点颜色即可；一般按一斤水放2.5克左右的茶叶、一两左右的白糖，掌握甜度不宜太淡，也不宜太甜，可口为佳。茶叶、白糖分别用干净的纱布包好）。将包好的茶叶、白糖放入水壶中，再将水烧开，直到白糖完全熔化在水中。
3、将烧开的茶糖水离火降温，等茶糖水降至40℃以下时，取出包茶叶、白糖的纱布袋，将茶糖水倒入玻璃瓶中，不能倒满，要留点空隙，以利空气流通。
4、将红茶菌菌种（包括菌母和菌液）全部倒入上述玻璃瓶中，然后用干净纱布盖住瓶口并用绳子扎好，放在光线好的地方，以便于观察，尽量不要摇动。温度在25-30℃之间，4天左右就成；温度在15-25℃之间，6天左右就成；15℃以下8天左右就成。检验红茶菌是否成功的最好办法是：只要培养的新红茶菌液面上开始长有一层透明的胶状质皮膜，就算成功。当老的菌种变黄发黑后，可丢弃它，以便让新菌种生长更快。
5、当你培养的红茶菌液面变厚增多时，按照上述方法分成多块，移至其他玻璃瓶中去，加上茶糖水，让其继续发酵。只要你制作中掌握得法，注意一切培菌用具都用开水消毒，不染油盐酒，一件红茶菌菌种就可世代相传。
6、红茶菌培养成功后就可直接饮用，想饮用时，就将培养成功的红茶菌液倒入口杯中或碗中，如同平时喝茶，想喝多少就倒多少，不受限制，一天可喝无数次。当你培养的红茶菌液因时间长了变酸时，可随时加入白糖水，调到你认为酸甜可口时为止。
7、红茶菌在世界各地一年四季都可培植。
红茶菌菌种的制作原理
1.首先应该对选择好培养红茶菌的容器进行消毒处理，可以放在开水中煮沸10分钟，也可直接用消毒水进行消毒。
2.原料的选择最好挑选一些没有经过处理的天然茶叶，糖最好选择白砂糖，葡萄糖，葡萄糖的长势更好，培养的更快，但是白糖做的口感会更好。
3制作母液：.在开水中加入红茶、白糖（冰糖）少许，调成稀的红茶糖水，在略煮灭菌后，即盛入消过毒的玻璃杯中，冷却到35度时，再加一块手指头大的红茶菌种，用洁净的纱布封住杯口，放置3-4天。
4.饮液的培养：在消过毒的大口瓶里，加进煮开的红茶糖水，冷却后，把母液加入，过一个星期之后发酵成酸甜茶叶即可饮用。茶液饮完，留下的菌母可以继续培养饮液。
本文《醋酸菌种自制过程》链接:https://www.tea-bar.com.cn/chayechaozhi-163514.html
